Фильтры для удаления вирусов и проблемы непрерывной биообработки

В этой веб-трансляции представлены:Кэтлин Маклафлин, старший научный сотрудник отдела исследований и разработок биопроцессов, Merck & Hironobu Shirataki, доктор философии, старший консультант по научным вопросам, глобальному маркетингу, отдел биопроцессов, Asahi Kasei Medical.

Во время этой веб-трансляции пройдут две презентации.

Оценка фильтра удаления вирусов Planova™ BioEX при непрерывной биообработке моноклональных антител, Кэтлин Маклафлин

Стандартные процессы серийного производства биологических препаратов моноклональных антител являются дорогостоящими и отнимают много времени. Переход на интенсивную непрерывную обработку обеспечивает гораздо более высокую производительность, особенно > 1,5 г/л/день в течение 25+ дней работы биореактора и 17+ дней последующей работы.

Наша инновационная платформа была протестирована в различных масштабах и местах. Он автоматически работает от начала до конца между операциями поэтапного запуска и завершения работы. После запуска восходящего процесса и достижения определенных пороговых значений автоматически запускается нижестоящий процесс. При достижении стабильной массовой производительности начинается следующая работа агрегата.

Ключевые проблемы при непрерывном производстве включают управление паузами в процессе, что особенно важно для очистки от вирусов, и частую замену фильтров с эксплуатационной точки зрения.

В этой презентации будет представлен обзор стратегии непрерывного производства компании Merck с акцентом на разработку процесса этапа вирусной фильтрации. Это включает в себя оценку количества загрузки, pH и проводимости двух нанофильтров, при этом pH нагрузки является наиболее значимым фактором. Это привело к выбору Planova BioEX в качестве фильтра для удаления вирусов и его использованию (одному из первых, насколько нам известно) в непрерывном производстве в течение 21 дня.

Исследование очистки вирусов при постоянной скорости потока для фильтра удаления вирусов Planova™ BioEX и S20N и внедрение в сквозной непрерывный процесс очистки моноклональных антител, Хиронобу Ширатаки, доктор философии

Фильтрация вирусов осуществляется в конце последующей обработки и является важным этапом удаления вирусов из биофармацевтических продуктов. Однако исследования и технологические разработки для интеграции фильтрации вирусов в непрерывные процессы все еще продолжаются. Одним из предлагаемых решений является интеграция фильтров после процессов колоночной хроматографии, но существуют такие проблемы, как балансировка пропускной способности и скорости потока в системе, технологические паузы, влияющие на надежность вирусных фильтров, и стабильность давления при длительной фильтрации.

Мы исследовали поведение фильтрации и способность удаления вируса для процесса моноклональных антител (MAb) в интегрированной колоночной хроматографии и установке для фильтрации вирусов при постоянной скорости потока. Колонки AEX смешанного режима и модифицированные колонки CEX работали последовательно в интегрированной установке без пула с подключенным вирусным фильтром Planova BioEX площадью 0,0003 м2.

Чтобы исследовать надежность фильтра, были проведены тесты на очистку фильтра от вирусов с использованием метода встроенного пикового теста. Чтобы решить проблему прорыва вируса, на этапе фильтрации вируса была проведена 60-минутная технологическая пауза между загрузкой раствора MAb и промывкой для восстановления. Раствор MAb с количественным содержанием белка клетки-хозяина, который был обработан в интегрированной установке, достиг высокого снижения HCP и высокого извлечения MAb. Поточный тест на всплеск вируса при постоянном потоке 40 LMH показал значительное снижение количества вируса MMV.

Последовательный процесс с двумя колонками также показал высокую степень снижения количества вирусов: тесты на MMV показали LRV вируса более пяти даже при скорости потока менее пяти LMH для фильтров Planova BioEX. Таким образом, подтвержденная интегрированная установка, соединяющая две колонки и вирусный фильтр напрямую, была внедрена в сквозной непрерывный процесс.

При этом была проведена групповая инактивация вируса с автоматическим контролем pH для уточнения концепции производственной партии. Этот процесс продемонстрировал стабильный непрерывный процесс MAb от перфузионной культуры клеток до фильтрации вируса с высокой очисткой и восстановлением.